Food Chem(IF=9.23)|集美大学研究人员解析过敏原α-TM中N糖的特异性修饰位点

贝类过敏与免疫球蛋白(Ig)E相关,可促使生物呼吸、消化和神经系统发生不良反应。已知大麻中有一种名为α-TM的原肌球蛋白可与免疫球蛋白(Ig)E结合,诱导贝类发生过敏反应,但其具体的分子机制仍不清楚。

2023年3月集美大学海洋食品与生物工程学院刘光明、纪乃茹等在Food chemistry(IF=9.23)上发表了名为“Effects of three processing technologies on the structure and immunoreactivity of α-tropomyosin from Haliotis discus hannai”的研究文章,旨在探究TG催化的交联反应、TG催化的糖基化和糖基化对皱纹盘鲍(贝类)中α-TM免疫反应的影响。研究人员首先将α-TM纯化,探究其与IgG/IgE结合的能力,并利用LC-MS/MS对其修饰位点进行质谱分析,最终确定α-TM功能特性及糖化位点。该过程中,拜谱生物提供N-糖基化修饰组学技术服务。


Food Chem(IF=9.23)|集美大学研究人员解析过敏原α-TM中N糖的特异性修饰位点
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文章名称:Effects of three processing technologies on the structure and immunoreactivi‐

ty of α-tropomyosin from Haliotis discus hannai.Food chemistry. IF=9.231,2023.3)

客户单位:集美大学

研究材料:添加α-TM的鲍鱼血清

拜谱提供技术:N-糖基化修饰组学

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01 研究路线



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图1| 研究路线图

(图源:Nairu Ji., et al., Food Chem., 2023)


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02 研究结果




作者首先将α-TM加工处理,并对它的结构及其免疫特性进行分析,然后用LC-MS/MS对它的糖基化结构进行质谱分析。这一过程中先将糖化的α-TM用胰蛋白酶水解,然后用C18柱脱盐、冻干。冻干样品用凝集素混合物富集溶解1h,离心(14000 g,30 min,4°C),再把样品用PNGase F在37°C下消化过夜,再次冻干。冻干样品采用NasynLC1200色谱系统进行色谱分离,然后用Q-Exactive HF-X质谱仪进行DDA质谱分析。结果显示其中有9个氨基酸(M13、N17、 N44、C50、N55、M68、N102、N202和N203)被完全修饰,5个氨酸(M8、N11、N25、C45和N52)未被完全修饰(图2A)。将修饰后的酸定位到α-TM(图2B)的三维(3D)结构上,发现L-HTM-1、L-HTM-3和L-HTM-7被修饰,表位位点分别为 N11、M13、N17、N25、M68、N202和N203(图2B)。这一过程中拜谱生物提供N-糖基化修饰组学技术服务,发现α-TM蛋白的糖基化修饰位点。

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图2| α-TM修饰位点的鉴定

(图源:Nairu Ji., et al., Food Chem., 2023)

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03 拜谱小结




研究发现tg催化的交联、tg催化的糖基化和糖基化不仅降低了α-螺旋的含量,也提高了α-TM表面的疏水性,此外Xyl糖化α-TM的IgG/IgE结合能力最低,糖基化位点质谱分析验证了糖化α-TM上的9个特异性氨基酸在两个表位(L- 399 HTM-3和L-HTM-7)上,一定程度上影响了α-TMIgE的结合能力,该研究结论为探索低过敏性鲍鱼提供了新的研究方法。在本次项目中,拜谱生物提供了N-糖基化修饰组学服务,此外拜谱生物还可以提供O-GlcNAc糖基化修饰、独家棕榈酰化修饰、超高深度磷酸化修饰以及氧化修饰、亚硝基化修饰、全局组蛋白修饰等多种修饰组学服务,欢迎对修饰组学有兴趣的老师咨询!

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参考文献:Ji N, Yu C, Han X, He X, Kang S, Bai T, Liu H, Chen G, Cao M, Liu G. Effects of three processing technologies on the structure and immunoreactivity of α-tropomyosin from Haliotis discus hannai. Food Chem. 2023 Mar 30;405(Pt B):134947. 


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