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质谱法N/C端测序
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方法简介


质谱法能对侧链基团翻译后加工或化学修饰进行定位,且弥补了传统的Edman降解法不适用于N端封闭的缺陷。且蛋白质的C末端分析并不能采取类似N端的化学分析,现阶段是采取质谱法对蛋白质样品的C末端序列进行分析。质谱法N/C端测序可以用于确认重组蛋白是否得到完整表达,以及重组蛋白N端和C端序列是否发生修饰。我们首先分析靶蛋白的氨基酸序列信息,选择特定的蛋白酶对靶蛋白进行酶切,得到合适长度的蛋白质N端和C端肽段,然后进行质谱分析,确认靶蛋白的N端和C端序列信息。


质谱法N/C端测序

样品要求


关于样品:可以提供蛋白冻干粉或蛋白质溶液;至少需要20ug的蛋白质,纯度>90% ;含盐量:挥发性无机盐<20mM,不挥发性无机盐<5mM;蛋白溶液避免SDS等变性剂,表面活性剂,不含tris缓冲体系。

样品运输:请使用足量的干冰运输,并尽量选用较快的邮递方式,以降低运输过程中样品降解的可能性。


案例分析


质谱法N/C端测序

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